顯微鏡是世界上無(wú)數(shù)研究實(shí)驗(yàn)室的主力，具有廣泛的功能，從常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)檢查到生成多層，高分辨率的納米級(jí)標(biāo)本圖像。各種不同的顯微鏡平臺(tái)為現(xiàn)代系統(tǒng)的廣泛多功能性提供了便利，從而為這種豐富的應(yīng)用提供了便利。這種多樣性加上傳統(tǒng)上提供顯微鏡的模塊化方式，可能會(huì)讓研究人員為他們的實(shí)驗(yàn)室或核心設(shè)施購(gòu)買(mǎi)新的顯微鏡而淹沒(méi); 雖然他們可以肯定他們理想的顯微鏡設(shè)置在某處，但挑戰(zhàn)在于識(shí)別它。在這里，我們將介紹在選擇**能滿(mǎn)足您的研究需求的成像解決方案時(shí)需要考慮的一些關(guān)鍵功能。

確定您的需求

確定您的需求并預(yù)測(cè)您將使用您的成像平臺(tái)執(zhí)行的應(yīng)用程序，包括您計(jì)劃在線(xiàn)上進(jìn)行的任何應(yīng)用程序，將使選擇和決策過(guò)程更加順暢。

負(fù)責(zé)美國(guó)卡爾蔡司顯微鏡生命科學(xué)和學(xué)術(shù)產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)的產(chǎn)品經(jīng)理Scott Olenych建議：“在您的腦海中清楚地了解您需要完成的應(yīng)用和工作[使用成像設(shè)置]。優(yōu)秀的銷(xiāo)售代表將傾聽(tīng)您的需求。例如，如果您想進(jìn)行鈣成像，他們會(huì)將這些需求納入您的工作流程。明確定義應(yīng)用程序是您邁出的**步。“

直立還是倒置？

當(dāng)然，考慮您的預(yù)期應(yīng)用和您希望查看的樣品將幫助您立即決定是否需要直立或倒置顯微鏡，其中光學(xué)器件分別位于樣品的上方或下方。奧林巴斯副產(chǎn)品經(jīng)理勞倫&midDOt;阿爾瓦倫加說(shuō)：“另一件需要考慮的事情不僅僅是樣品本身，而是你的樣品將是什么樣的容器或容器。” “這對(duì)于幫助您選擇直立或倒置顯微鏡也很重要。如果您的目的是用燒瓶或塑料盤(pán)子成像，那么您將需要一臺(tái)倒置的顯微鏡，并且具有長(zhǎng)工作距離的物鏡，以適應(yīng)您的容器厚度。“

顯微鏡領(lǐng)域的一個(gè)有趣的新人是ECho Laboratories的Revolve顯微鏡，它不需要在直立或倒置之間進(jìn)行選擇。這種混合平臺(tái)可以相對(duì)快速，輕松地在兩種成像模式之間切換，如果您需要兩種類(lèi)型的儀器但空間不足，它還可以為您的實(shí)驗(yàn)室騰出空間。

光學(xué)

分辨率 - 您查看內(nèi)容的詳細(xì)程度以及圖像分辨的速度 - 是另一個(gè)重要的考慮因素。

McCrone集團(tuán)的儀器部門(mén)McCrone Microscopes＆Accessories總裁Jeff McGinn強(qiáng)調(diào)，目標(biāo)是**關(guān)重要的：“物鏡上的數(shù)值孔徑（NA）越高，其分辨能力越強(qiáng)。除了預(yù)算之外，我們還會(huì)根據(jù)客戶(hù)想要看到的細(xì)節(jié)數(shù)量來(lái)評(píng)估客戶(hù)NA。“除了NA之外，還要看看顯微鏡物鏡提供的球面和色差的校正。

在任何預(yù)算限制方面，Alvarenga建議：“選擇你能買(mǎi)得起的**好的物鏡。物鏡的質(zhì)量將直接影響您的數(shù)據(jù)質(zhì)量，因此這是一個(gè)非常重要的考慮因素。“那么您就擁有了針對(duì)特定技術(shù)設(shè)計(jì)的物鏡，例如相位對(duì)比或帶硅光學(xué)的延時(shí)成像。在濕實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中通常需要相襯，尤其是進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)或活力測(cè)定的實(shí)驗(yàn)室。還要看工作距離（或WD，鏡頭和樣品之間的空間），以及它是否與您的樣品類(lèi)型兼容。

發(fā)現(xiàn)

顯微鏡光路的另一個(gè)重要部分是用于檢測(cè)樣品信號(hào)的收集裝置。

“相機(jī)技術(shù)正在迅速發(fā)展，”Olenych說(shuō)，他看到對(duì)基于CMOS的相機(jī)芯片的需求增加，而不是更傳統(tǒng)的CCD技術(shù)。他解釋說(shuō)，CMOS芯片“尺寸通常比CCD芯片大，并且具有更高的靈敏度。它們具有更多的像素，這意味著更小的區(qū)域可以更詳細(xì)地成像。“光電倍增管或PMT也是不需要空間分辨率的應(yīng)用中的一種選擇。此外，由于PMT不存儲(chǔ)電荷并在幾納秒內(nèi)響應(yīng)輸入光通量的變化，因此它們可用于檢測(cè)和記錄極快的事件。

可用性

可能影響您決策的另一個(gè)因素是系統(tǒng)的可用性。儀器的用戶(hù)友好性在很大程度上取決于其軟件界面。“奧林巴斯軟件在其所有系統(tǒng)中都非常普遍，這減少了在新系統(tǒng)中找到方法或教導(dǎo)新人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室所需的時(shí)間，”Alvarenga說(shuō)。一些顯微鏡開(kāi)發(fā)人員已經(jīng)引入了依賴(lài)觸摸屏技術(shù)來(lái)控制儀器的直觀界面。例如，ECho Laboratories的Revolve由iOS應(yīng)用程序控制，該應(yīng)用程序具有縮放縮放功能，可以在單擊中對(duì)單元格進(jìn)行計(jì)數(shù)。“可用性曾經(jīng)是圖騰柱上**低的，但它對(duì)用戶(hù)來(lái)說(shuō)變得越來(lái)越重要，”ECho實(shí)驗(yàn)室**執(zhí)行官兼創(chuàng)始人Eugene Cho解釋道。

選擇供應(yīng)商

“選擇一臺(tái)顯微鏡真的歸結(jié)為選擇合適的公司，”Olenych建議道。除了研究不同供應(yīng)商的產(chǎn)品之外，區(qū)分哪個(gè)公司的**佳方法之一是向同事尋求建議。請(qǐng)記住，你正在與這家公司建立持續(xù)的合作關(guān)系，因此找到適合自己的公司**關(guān)重要。

哈佛醫(yī)學(xué)院神經(jīng)生物學(xué)成像設(shè)施的核心設(shè)施經(jīng)理兼**成像專(zhuān)家Michelle Ocana在選擇供應(yīng)商方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)。一般來(lái)說(shuō)，她會(huì)接近少數(shù)不同的供應(yīng)商。“**少有兩個(gè)，但多達(dá)五個(gè)，取決于產(chǎn)品，”她解釋道。“我也試著聯(lián)系我以前從未處理過(guò)的供應(yīng)商，這樣我就可以看一下新產(chǎn)品并了解客戶(hù)經(jīng)理。”然后Ocana邀請(qǐng)每位銷(xiāo)售代表進(jìn)入該部門(mén)，提供一個(gè)關(guān)于設(shè)備并回答研究人員提出的問(wèn)題。“然后我會(huì)和他們坐下來(lái)，我們將進(jìn)行一對(duì)一的討論以討論細(xì)節(jié)。”

演示

在做出**終選擇之前，您還應(yīng)該使用自己的樣本演示一個(gè)系統(tǒng)，“這樣您就可以了解樣本如何真正與特定儀器進(jìn)行交互，”Alvarenga說(shuō)。

“當(dāng)你進(jìn)入決策過(guò)程的演示部分時(shí)，你應(yīng)該已經(jīng)對(duì)光路和技術(shù)的設(shè)計(jì)方式感到滿(mǎn)意，”Ocana說(shuō)。“你真正需要做的是評(píng)估系統(tǒng)在硬件和軟件方面是否穩(wěn)定。”她建議你將平臺(tái)演示幾天并將其推向**極限：“我們通常會(huì)演示一些東西一次一個(gè)星期。那個(gè)星期，我們廣泛使用這些設(shè)備; 我們?cè)噲D打破它，所以我們可以看到它在何時(shí)何地發(fā)生故障，以及供應(yīng)商如何快速修復(fù)它。“她解釋說(shuō)這是一個(gè)很好的跡象，表明公司和銷(xiāo)售代表將如何繼續(xù)支持你儀器的壽命。

持續(xù)的支持

購(gòu)買(mǎi)顯微鏡是更大工藝的**步。“一旦你的實(shí)驗(yàn)室安裝了一個(gè)系統(tǒng)，重要的是你要學(xué)會(huì)關(guān)心它，以便它在未來(lái)幾年繼續(xù)保持**佳性能，”Alvarenga分享道。許多著名的制造商提供培訓(xùn)計(jì)劃，無(wú)論是在您的機(jī)構(gòu)現(xiàn)場(chǎng)還是在他們自己的教學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

還提供延長(zhǎng)保修計(jì)劃，以幫助降低與此次大額購(gòu)買(mǎi)相關(guān)的維護(hù)成本。但并非每種工具都需要它們。Ocana有這樣的建議：“**終歸結(jié)為計(jì)時(shí)：你的系統(tǒng)可以停機(jī)多長(zhǎng)時(shí)間？如果您需要**快的周轉(zhuǎn)時(shí)間讓您的系統(tǒng)重新啟動(dòng)并運(yùn)行，那么您應(yīng)該進(jìn)行保修。“

**后一句話(huà)

有許多顯微鏡選項(xiàng)和功能供科學(xué)家選擇。有時(shí)，選擇可能是壓倒性的。**好的方法是進(jìn)行研究，比較儀器，考慮您當(dāng)前的需求并為未來(lái)做好計(jì)劃。**后，正如McGinn所說(shuō)：“顯微鏡是有趣的科學(xué); 我們喜歡看到肉眼無(wú)法看到的東西，發(fā)現(xiàn)我們不知道的東西。“